产品货号:
BTN81217
中文名称:
微量蛋白沉淀试剂盒
英文名称:
Mini Protein Precipitation Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒用于微量沉淀浓缩蛋白质样品,其原理是通过酸使蛋白质变性,溶解度降低,在离心条件下沉淀,而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。同时,还可以去除污染的盐离子和其他小分子。
- 操作方便迅速,只需要混匀后离心,不需要其他仪器。
- 产品稳定,可室温长期放置。
- 可以处理各种液体样品(如细胞或细菌培养物,细胞裂解物,蛋白质提取物等等)。
- 浓缩效果强,如果样品不含SDS,最低可浓缩浓度低达1μg/mL的蛋白;如果含SDS,最低可浓缩浓度为5μg/mL。
- 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性,没有活性。
组分 | 规格 |
微量蛋白沉淀溶液A | 0.5mL |
微量蛋白沉淀溶液B | 1mL |
微量蛋白沉淀溶液C | 50mL |
保存:室温,有效期1年。
一、用于不含SDS的样品,但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL
- 将100μL需要沉淀浓缩的蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
- 加入10μL微量蛋白沉淀溶液A,涡旋激烈震荡10~30秒混匀。
- 冰上放置15分钟。
- 加入10μL微量蛋白沉淀溶液B,轻轻混匀。
- 冰上放置60分钟。
- 4℃12000~15000×g离心10分钟。
- 小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
- 加入1mL冰浴的微量蛋白沉淀溶液C,震荡混匀后4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
- 小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
- 短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
- 样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8),直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
二、用于含SDS的样品,但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL
- 将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品(浓度不低于5μg/mL)转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
- 加入8μL微量蛋白沉淀溶液B,涡旋激烈震荡10~30秒混匀。
- 冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
- 4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
- 小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
- 加入1mL冰浴的微量蛋白沉淀溶液C,震荡混匀后4℃ 12000~15000×g离心15分钟。
- 小心移弃上清液,保留蛋白沉淀。
- 短暂离心,小心移弃残留上清液后,将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上,空气晾干。一般需要10分钟左右。
- 样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀,取适量上样。如果蓝色的溴酚蓝染料变黄,则说明有残留酸性物质TCA污染,必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8),直到颜色变成蓝色为止,否则将影响电泳结果。
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